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    厭氧培養箱的操作規范
    發布日期:2023/5/13 9:57:42
    一、 操作室厭氧環境形成
    1.按使用要求放置好必要的配件和器具,并向操作室內放入兩個無毒塑料袋。
    2.通電源開照明燈,開控溫儀,調節所需溫度及安全溫度。
    3.操作室內放入鈀粒(封閉)和干燥劑,并放入美蘭指示劑(封閉)。
    4.關緊取樣室內外門,并抽真空校驗。
    5.操作室內第一次置換(氮氣置換):
    (1)先用橡皮管插入操作室內進氣口,另一頭插入塑料袋。
    (2)接通氮氣進氣路,打開氮氣控制閥,使兩只塑料袋充足氮氣,然后扎緊袋口。
    (3)把乳膠手套套在觀察板法蘭圈上并扎緊。
    (4)把塑料袋內氮氣漸漸地放于操作室內,至全部放出。
    6. 操作室第二次置換(氮氣置換)重復一次充氮過程,并注意隨時用腳踏開關開閉排氣。
    7. 操作室第三次置換(混合氣體置換)
    (1)調換氣路打開混合氣道通閥門進氣,充氣時要隨時腳踏開關開閉排氣。
    (2)混合氣充滿塑料袋后,關掉混合氣直通閥(三通閥),使混合氣經過流量計輸入操作并調整流量計,流量為每分鐘 10 mL左右。
    (3)把塑料袋內混合氣漸漸排于操作室內。
    (4)通過三次換氣后,操作室內氣體含氧量已處于極微量狀態。
    8.操作室內打開鈀粒除氧劑,接通除氧催化器電源進行催化除氧,一小時后打開美蘭指示劑觀察其變色情況,不變色為操作室內達到厭氧環境。
    9.開紫外線滅菌燈,室內進行滅菌處理。滅菌時間自定。
    二、菌種的置入和培養
    1.檢查取樣室內門并關緊。
    2.打開取樣室外門,將菌種放入取樣室后即關上外門。
    3.取樣室充氮置換三次,如選定真空度較低就需要增加置換的次數。
    5.取樣室內外門開啟,關緊要抽低真空度100mm汞柱(13Kpa)檢驗及幫助操作。
    6.厭氧培養箱需要長期連續使用的條件
    (1)每天在操作室內打開美蘭指示劑觀察,正常情況下使用。如不正常就必須重新換氣。
    (2)要長期連續輸入微量的混合氣體,使補進的氫氣能和微量的氧結合通過催化吸收,保證了室內厭氧狀態,補入混合氣流量選定為每分鐘 10mL左右。
    (3)連續培養運行一天,更換一次除氧劑和干燥劑。
    7. 接種棒滅菌器的應用
    (1)隨時用鎳鉻電熱絲使電極短路而變赤熱以進行殺菌(接種棒)。
    (2)熔蠟處可直接放上,試管封蠟口旋轉熔蠟。
    8. 操作室里的培養箱內的溫度可任意選擇和控制。

    9. 混合氣瓶、氮氣瓶輸出壓力調整:調節減壓閥,使輸出壓力為0.1Mpa左右。

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